生物安全柜內如何科學分區擺放工具

1 概述

今天的文章和大家分享生物安全柜（以下簡稱BSC）操作使用上的注意事項，包括：如何開關、工具如何分區擺放、運行時如何避免污染。

BSC是一種半密閉的通風設備，它為實驗操作者提供潔凈空氣，并且潔凈空氣按特定方向持續吹出。

BSC內提供了一個供操作者擺放實驗工具和操作的臺面，當設備運行時，臺面內的空間會持續獲得經過過濾的潔凈空氣；設備不運行時，可關閉臺面的玻璃門，并執行紫外照射**。

2 分類

BSC根據防護等級可以分為I、II和III三種等級。

I級保護樣品無菌，但不保護人員和環境，適用于低至中等風險的實驗操作；

II級（A1/A2/B1/B2型）同時保護人員、樣品和環境，適用中等至高風險操作，如病原體培養，其中A2和B型可處理揮發性有毒物質；

III級為全密閉，*高防護級別，用于高危病原體（如埃博拉病毒）。

如果我們的課題研究不涉及高風險病原微生物，那么細胞房內一般配備的是II級BSC。

從下方的II級BSC工作原理圖可見，細胞房內的空氣經過操作臺面前端的氣孔被吸入BSC內，經過內部管道流通后，到達操作臺面上方的HEPA濾膜。經濾膜過濾后的空氣從上至下吹送至操作臺面。這些吹向臺面的潔凈空氣，當吹過樣品和工具之后就不再潔凈了，它們會再次被臺面前端的氣孔回收進入二次循環。這樣，就確保了不潔凈的空氣不會吹出臺面進而污染操作者和環境。

所以說，II級BSC能保護樣品也能保護人員和環境。

3 如何開關

在每一次實驗操作之前，應該先擦拭干凈臺面，把稍后操作要用的工具按一定規則擺放好，然后關上玻璃門，設置紫外照射30分鐘，此時，人應遠離BSC等待**結束。

**結束后，關閉紫外，拉起玻璃門至適當高度（通常設備會有提示限高位置，超出后無法打開風機或報警），然后開燈和打開風機。等待內部氣流穩定5-10分鐘后，人再坐下來操作。

實驗操作結束后，清潔臺面，此時仍然應該讓風機繼續運行5-10分鐘，目的是徹底把內部空氣完成過濾。

4 如何擺放操作臺面呈矩形，工具擺放時應遵循科學分區原則：1 將臺面分為潔凈區、操作區和污染區；2 操作區在中間位置，潔凈區和污染區不相鄰；3 工具應盡量均勻展開，彼此不遮擋。潔凈區應擺放樣品和一次性耗材，例如吸頭、移液管、離心管、培養瓶皿。

操作區是實驗操作的區域，中間位置盡量留空，靠內側的位置可擺放移液器、試劑瓶。

污染區是存放廢棄物的地方，可以把廢液缸、垃圾桶放在這里，但應盡量靠內側、靠遠端放置（應確保與它們距離*近的瓶皿、設備至少相隔30厘米或以上）。

5 使用注意事項首先，正式操作時，操作者的手會多次伸入臺面，并在里面移動。我們應注意：1 手臂應與臺面呈垂直方向伸入；2 在內部左右移動時速度不要過快（見下圖）。這樣可以盡量降低手臂移動對垂直氣流帶來的擾動。

其次，臺面上的工具會被拿來拿去，要切記：1 工具用完后不要放錯區域；2 工具擺放的位置**不能擋住進氣孔。

**點的原因是避免工具擋住進氣孔，造成污染的空氣無法被回收，從而釋放到實驗室內，同時也會造成外部污染的空氣進入BSC時不能全部被吸入進氣孔，造成污染臺面。

*后，是盡量避免樣品、試劑被氣流長時間對著直接吹。這一點可能有點難理解，我們舉例說明。

例如，培養皿的蓋子打開后，手應該拿著蓋子擋住上方的氣流，而不是直接讓皿內的培養物被氣流持續吹著。一方面是防止空氣污染（雖然可能性很小），另一方面是避免強大的氣流把培養物內可能存在的污染吹出來。同理，試劑瓶也是如此。

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